【摘 要】
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目的 研究血管中骨髓间充质干细胞在不同钙化环境中的分化.方法 应用华法林,维生素K1及维生素D3制作血管钙化模型.造模成功后,分别取正常SD大鼠动脉和大鼠钙化动脉与MSC共培养,分为3组:正常组:正常动脉+MSC;钙化诱导剂组:钙化诱导剂(地塞米松+β-甘油磷酸钠+VitC)+正常动脉+MSC;钙化组:钙化动脉+MSC.各组均培养3周,实验第10天时采用ELISA检测OPG蛋白分泌情况,3周后倒置
【机 构】
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台州市第一人民医院神经内科 318020
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目的 研究血管中骨髓间充质干细胞在不同钙化环境中的分化.方法 应用华法林,维生素K1及维生素D3制作血管钙化模型.造模成功后,分别取正常SD大鼠动脉和大鼠钙化动脉与MSC共培养,分为3组:正常组:正常动脉+MSC;钙化诱导剂组:钙化诱导剂(地塞米松+β-甘油磷酸钠+VitC)+正常动脉+MSC;钙化组:钙化动脉+MSC.各组均培养3周,实验第10天时采用ELISA检测OPG蛋白分泌情况,3周后倒置显微镜观察各组细胞形态变化,ELISA检测总蛋白含量和和碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-PCR方法检测各组Ror2 mRNA表达.结果 钙化组中MSC自发增殖向成骨样细胞分化.与正常组相比较,钙化组中总蛋白含量,骨代谢标志物ALP活性,骨保护素(OPG)均明显升高,而Ror2(孤独受体2)mRNA表达则显著低于正常组.钙化诱导剂组中MSC未向成骨样细胞分化,与正常组相比,ALP活性无明显差异,但总蛋白含量及OPG均升高,Ror2 mRNA表达则低于正常组.其中,钙化组Ror2 mRNA表达明显低于钙化诱导剂组.
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