【摘 要】
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目的 通过大鼠肾脏组织局部转染NALP3特异性小干扰质粒(siRNA)后制作肾脏缺血再灌注损伤(IRI)模型,探讨病原体相关分子构象识别受体NALP3对大鼠肾脏IRI的影响及其作用机
【出 处】
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中国工程院医药卫生学部肾脏病前沿论坛、第十三届华北地区暨北京市肾脏病学术年会
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目的 通过大鼠肾脏组织局部转染NALP3特异性小干扰质粒(siRNA)后制作肾脏缺血再灌注损伤(IRI)模型,探讨病原体相关分子构象识别受体NALP3对大鼠肾脏IRI的影响及其作用机制. 方法 (1) 将健康SD大鼠随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(I/R)不同时间1h、2h、4h、8h、16h、24h组、空质粒+sham组、空质粒+I/R组和siRNA质粒+I/R组,摘除右肾一周后夹闭左肾动脉制作肾脏IRI模型,转染组摘除右肾后超声微泡造影技术完成转染一周后同样方法制作IRI模型,各组6只大鼠,留取血清及肾组织标本.(2) 对肾脏病理损伤进行评分并行半定量分析；血清检测Scr、BUN含量的变化. (3) western印迹法半定量分析肾组织NALP3的表达变化、ERK、JNK、P38磷酸化程度变化；RT-PCR检测NALP3mRNA表达变化. 结果 (1) 缺血再灌注不同时间模型组大鼠发生急性肾小管坏死,各组病理评分中以缺血再灌注4h组病理损伤最重(P＜0.01).(2) 缺血再灌注不同时间模型组大鼠血清Scr、BUN水平均有不同程度升高,以4h组最高.(3) 与假手术组比较,NALP3在缺血再灌注1h、2h、4h、8h、16h、24h表达显著增高(P＜0.05),4h达到最高,之后趋于稳定.(4) 与单纯缺血再灌注4h组比较,siRNA质粒+I/R组肾组织病理损伤明显减轻,JNK、P38磷酸化程度明显下降(P＜0.01),ERK磷酸化程度仍然较高. 结论 1) NALP3在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中表达增加,下调其表达后肾脏缺血再灌注损伤明显改善.2) MAPK通路在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中磷酸化程度明显增强,下调NALP3后磷酸化程度明显减少,提示下调NALP3对大鼠肾脏缺血再灌注损伤有明显保护作用,并且是通过抑制JNK、P38的活化实现的.
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