基因工程菌生产乙醛酸关键酶基因的克隆及表达

来源 :第十届全国生物化工学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heeroyuyo
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采用RT-PCR技术从菠菜总RNA中扩增了乙醇酸氧化酶(CO)基因的cDNA序列,克隆到质粒pMD18-T,然后将GO基因分别亚克隆至质料pThioHisC、pTIG-Trx、pBV220和pET-2b(+),转化大肠杆菌DH5α和BL21(DE3),并对重组乙醇酸氧化酶在大肠杜菌中的表达进行了研究.SDS-PAGE和酶活分析表明,GO在E.coli BL21(DE3)(pTIG-Trx-Go)和E.coli BL21(DE3)(pET-22b(+)-GO)里得到了高水平的表达,其中E.coli BL21(DE3)(pET-22b(+)-GO)的GO活性较高.
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