【摘 要】
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为研制四环素胶体金免疫层析试纸条,本文对胶体金的制备及与四环素多克隆抗体标记进行研究.采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,即向加热沸腾的100mL 0.01％氯金酸中加入1.8 m
【机 构】
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河北北方学院食品安全研究中心 河北张家口075000
【出 处】
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中国食品科学技术学会第十四届年会暨第九届中美食品业高层论坛
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为研制四环素胶体金免疫层析试纸条,本文对胶体金的制备及与四环素多克隆抗体标记进行研究.采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,即向加热沸腾的100mL 0.01％氯金酸中加入1.8 mL 1％柠檬酸三钠,加热15 min后冷却定容；采用已制备好的胶体金溶液标记四环素多克隆抗体,即将装有1 mL胶体金的离心管中加入一定量K2CO3调节pH值,加入一定量抗体蛋白后4℃条件下反应30 min,再加入100μL NaCl后4 ℃条件下保存备用,标记成功后优化条件.结果表明,胶体金颜色为紫红色、清亮透明、无沉淀及漂浮物,可见光光谱峰宽较小,证明胶体金大小分布均匀,制备成功；硝酸纤维素膜(NC膜)上有明显红色斑点,可见光光谱中最大吸收峰出现偏移,证明胶体金标记抗体成功；胶体金标记四环素多克隆抗体的最佳pH值为7.5,最佳标记抗体蛋白量为7.5μg/mL.胶体金的制备及与四环素多克隆抗体标记的成功,为以后装配四环素胶体金试纸条奠定了基础,为四环素在食品样品中的快速检测方法的建立提供理论参考.
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