水蛭不同提取工艺抗凝活性比较及酶提物组成分析

来源 :2009全国中药创新与研究论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dephibase
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目的:比较水蛭不同提取工艺抗凝作用,初步研究水蛭酶解产物的化学成分组成,为水蛭进一步开发提供实验依据。方法:以活化部分凝血活酶时间(APTT)实验及纤维蛋白平板实验等抗凝活性为指标,评价水蛭不同提取工艺的差别;将水蛭胃蛋白酶水解物经Sephadex G-100凝胶色谱分离纯化,用MALDI-TOF-MS法对其组成进行分析。结果:水蛭仿生酶解得到的胃蛋白酶水解物(未调pH)及胃蛋白酶水解物(调pH4~5)较之水煎和醇提工艺提取物可使大鼠APTT显著延长,纤维蛋白平板实验呈明显的溶解圈。SephadexG-100凝胶柱色谱分离纯化得到两个混合多肽组分,经MALDL-TOF-MS检测其相对分子质量范围在700~3 200之间。结论:水蛭酶法提取物的体外抗凝与溶栓活性强于其他几种提取方法;水蛭经胃蛋白酶水解后已经形成寡肽。
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