【摘 要】
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目的设计特异性鉴别民族傣药鼓槌石斛的PCR引物,并优化PCR检测体系,确立一种快速、准确鉴别鼓槌石斛的方法。方法从GenBank数据库中下载石斛属rDNA ITS序列170余条,运用MEGA
【机 构】
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中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所;
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目的设计特异性鉴别民族傣药鼓槌石斛的PCR引物,并优化PCR检测体系,确立一种快速、准确鉴别鼓槌石斛的方法。方法从GenBank数据库中下载石斛属rDNA ITS序列170余条,运用MEGA 5.0对所有序列进行同源性比较,找出各变异位点,在非保守区设计1对特异性引物。对35份石斛属植物DNA模板进行特异性引物PCR扩增,显示阳性者为鼓槌石斛。结果将退火温度提至58℃时,鼓槌石斛能被该引物特异性的扩增出来,而其他石斛属植物均为阴性,且该引物的灵敏度可达到0.69 ng·μL-1。结论本研究设计一种特异性鉴别鼓槌石斛的方法。运用该特异性引物可实现从同源物种中快速、准确地鉴定出鼓槌石斛。较传统形态学、显微鉴定以及色谱、光谱等方法,该方法特异性好,具有操作简便、高效、准确等优点。
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