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背景与目的:肿瘤相关新基因A54—3是利用DDRT—PCR技术,对G1期和S期的胃癌细胞系BGC823进行研究后获得的新基因,位于9q34.3,编码的蛋白位于核内,可能具有促进细胞增殖的功能。脑胶质瘤是神经外科最常见的颅内肿瘤,其内在的分子学发病机制尚未明了。本研究着眼于基因A54—3在正常脑组织和胶质瘤中的表达情况,以期了解是否与胶质瘤恶性程度相关,并获得信息为进一步揭示胶质瘤的发病机理提供帮助,最终有利于临床治疗和判断预后。
材料和方法:留取各类胶质瘤与正常脑组织的冰冻标本各51例和9例。胶质瘤中包括11例胶质母细胞瘤,1例间变少枝胶质细胞瘤,6例间变少枝星形细胞瘤,4例胶母变肿瘤,7例室管膜瘤,1例少枝胶质细胞瘤,11例星形细胞瘤,10例少枝星形细胞瘤。脑组织来源于脑外伤减压手术。分别提取组织的总RNA,针对A54—3选用引物进行RT—PCR,检测A54—3的mRNA表达水平,Western Blotting从蛋白水平验证A54—3的表达。运用行×列的x 2检验对RT—PCR的阳性结果进行统计学分析。把202例胶质瘤的石蜡标本制成组织芯片,运用mRNA原位杂交技术检测A54—3的表达情况。
结果:RT—PCR显示在9例正常脑组织中未有A54—3的表达,51例胶质瘤中有8例(15.69%)出现表达。这8例A54—3表达阳性的胶质瘤中,5例(41.67%,5/11)为胶质母细胞瘤,另外3例分别为少枝胶质细胞瘤(100%,1/1)、星形细胞瘤(9.09%,1/11)和少枝星形细胞瘤(10%,1/10),而A54—3在室管膜瘤中不表达。x 2检验结果显示,胶质母细胞瘤与其它级别胶质瘤存在显著差异,p=0.0078(p<0.05)。Western Blot结果显示3例正常脑组织中无A54—3蛋白的表达,1例少枝胶质细胞瘤和1例星形细胞瘤中出现A54—3蛋白,而3例胶质母细胞瘤中未有蛋白显影。
结论:1.肿瘤相关新基因A54—3在正常脑组织中不表达;2.A54—3在脑胶质瘤中表达,表达率为15.69%(8/51);3.A54—3在胶质母细胞瘤中的表达率为41.67%,明显高于其在其它性质的胶质瘤中的表达率7.5%,两者存在明显差异,p=0.0078(<0.05); 4.A54—3在胶质瘤中的表达情况与肿瘤的恶性程度呈正相关。