【摘 要】
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目的:探讨山药多糖抗神经细胞缺氧性凋亡作用及机制.方法:研究分为正常对照组,凋亡诱导组,山药多糖0.025g/L组,山药多糖0.05g/L组,山药多糖0.1g/L组,山药多糖0.25g/L组.采用"Neurobasal+B27"体外神经细胞无血清培养,免疫细胞化学鉴定神经细胞,MTT测定药物毒性,Rh-123染色检测线粒体损伤,AnnexinV/PI双染流式细胞仪及Hochest33342荧光染色
【机 构】
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南昌大学研究生院医学部,南昌 330006 复旦大学上海市肿瘤医院,上海 200032
【出 处】
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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会
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目的:探讨山药多糖抗神经细胞缺氧性凋亡作用及机制.方法:研究分为正常对照组,凋亡诱导组,山药多糖0.025g/L组,山药多糖0.05g/L组,山药多糖0.1g/L组,山药多糖0.25g/L组.采用"Neurobasal+B27"体外神经细胞无血清培养,免疫细胞化学鉴定神经细胞,MTT测定药物毒性,Rh-123染色检测线粒体损伤,AnnexinV/PI双染流式细胞仪及Hochest33342荧光染色检测细胞凋亡,RT-PCR及免疫细胞化学测定Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表达.结果:无血清培养神经细胞的比例达93.70％±0.56％.山药多糖在2.0g/L之内预处理神经细胞对其无毒性作用.山药多糖在0.05g/L-0.1g/L范围显著地改善缺氧对神经细胞生长的抑制(P＜0.05).山药多糖在0.025g/L0.25g/L抑制缺氧的神经细胞线粒体损伤.0.025g/L-0.25g/L范围内显著地抑制缺氧复氧诱导的神经细胞早期凋亡(P＜0.05).山药多糖在0.025g/L或0.1g/L-0.25g/L下调Caspase-3蛋白或mRNA的表达,0.05g/L或0.1g/L-0.25g/L下调Bax mRNA或蛋白的表达,0.05g/L-0.1 g/L或0.25g/L上调Bcl-2 mRNA或蛋白的表达,0.05g/L-0.1 g/L提高Bcl-2/Bax mRNA及0.025g/L-0.25g/L提高Bcl-2/Bax蛋白的比例(P＜0.05).结论:山药多糖在一定浓度范围内能有效地抑制神经细胞缺氧性凋亡,其机理是降低凋亡基因及蛋白产生,上调抗凋亡基因及蛋白产生.
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