【摘 要】
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目的:研究三七皂苷（PNS）促进人骨髓红系、粒系和巨核系造血祖细胞 （CFU-GM、CFU-E 和 CFU-MK）增殖的类糖皮质激素（GC）样效应,借鉴 GC 作用的信号传递途径,探讨 PNS 对糖皮质激素受
【机 构】
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浙江中医药大学附属第一医院血液病研究所; 复旦大学生命科学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No．30070933)
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目的:研究三七皂苷（PNS）促进人骨髓红系、粒系和巨核系造血祖细胞 （CFU-GM、CFU-E 和 CFU-MK）增殖的类糖皮质激素（GC）样效应,借鉴 GC 作用的信号传递途径,探讨 PNS 对糖皮质激素受体核转录因子（GR-NTF）的诱导作用。方法:人骨髓造血祖细胞半固体集落培养,以不同浓度的 PNS 作刺激增殖试验。选择恰当浓度的 PNS（20mg/L）较长时间地诱导人粒系 HL-60、红系 K562、巨核系 CHRF-288和 Meg-01三系细胞株,用地塞米松（Dex）作阳性对照,均提取核蛋白,Western 免疫印迹法检测 GR-NTF 蛋白量。并用32P 标记的具有与 GR-NTF 蛋白结合位点的双链寡核苷酸探针作电泳带移动阻滞试验（EMSA）。结果:①PNS 促进人骨髓红系、粒系和巨核系造血祖细胞增殖,CFU-GM、CFU-E 和 CFU-MK 集落提高率分别为39.3±5.7%、33.3±7.3%和26.2±3.2%（P<均0.01）。②用抗 GR-NTF 氨基和羧基端的二个抗体作 Western 免疫印迹,PNS 诱导的 K562、CHRF-288和 Meg-01细胞核内 GR-NTF 氨基和羧基端的表达分别是未经处理细胞的2.4～2.8倍和1.3～3.9倍;阳性对照 Dex 也诱导 GR-NTF 蛋白量增加。③EMSA 分析经 PNS 或 Dex 处理后,K562和 CHRF-288细胞的 GR-NTF 蛋白与 DNA 结合复合物的条带密度均明显增加,提示 PNS 和 Dex 均能诱导 GR-NTF 与 DNA 启动子/增强子结合的活性增高;HL-60细胞本身活性低,经 PNS 处理后也出现特异性条带。结论:PNS 促进造血细胞增殖的效应涉及到 GR-NTF,通过诱导 GR-NTF 量增加,且与基因上游调控区域的启动子/增强子结合的活性增高,而调控造血细胞增殖相关基因的转录和表达,具有类糖皮质激素样效应。
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