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目的 探讨三种大鼠肝细胞原代分离培养的方法的差别.方法 采用原位两步胶原酶灌流法(A法)、离体两步灌流法(B法)及剪切消化法(C法)三种方法分离大鼠肝细胞，采用血细胞计数法计数肝细胞产量，采用0.4％台盼蓝染色观察细胞活力，用PercoI1分离液进行密度梯度离心纯化肝细胞至活力在92％以上，然后将细胞接种于DMEM-F12培养基中培养，糖原染色法(PAS法)鉴定分离肝细胞，倒置相差显微镜观察肝细胞形态，定期收集肝细胞培养液上清检测葡萄糖、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白的水平.