本研究对健康香蕉植株体内的内生细菌进行了分离纯化,得到63株内生细菌菌株。采用平板对峙法筛选出2株对香蕉枯萎病具有强烈拮抗作用的菌株。通过生理生化、形态特征及16S rDNA序列同源性比较,鉴定均为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis,命名为HZY-11、HZY-23）。采用不同处理方法研究菌株HZY-23对香蕉枯萎病的防效,试验结果表明,接种致病菌前喷施拮抗菌发酵液的防效显著高于同时接种的防效,同时接种的防效高于接种致病菌后喷施拮抗菌发酵液的防效。为了获得最佳的发酵条件,提高HZY-23的液体发酵水平,本研究在单因素试验优化基础上,采用Plackett-Burman设计确定葡萄糖、氯化铵、温度、pH为HZY-23液体发酵水平的显著影响因素,通过最陡爬坡路径试验、中心组合设计和响应面分析法确定最优培养条件。试验结果表明,最优培养培养基为:葡萄糖0.98%,氯化铵0.87%,氯化钙0.5%;最适培养条件为:发酵温度31.09℃,pH 7.11,摇床转速150r/min,发酵时间36h。在最佳培养条件下,液体发酵活菌数达2.9×10⁹CFU/mL。为了提高发酵液中HZY-23的芽孢数量,采用单因素试验,通过液体摇瓶培养对HZY-23菌株的芽孢发酵培养基和培养条件进行了筛选和优化。采用Plackett-Burman设计确定影响该菌芽孢产量的3个主要因素:玉米粉、大豆饼粉、MgSO₄,通过最陡爬坡路径试验、中心组合设计和响应面分析法确定最优培养条件。试验结果表明,HZY-23菌株芽孢发酵的最适培养基为:玉米粉1.147%,大豆饼粉1.115%,氯化钠0.5%,MgSO₄0.06%;最适培养条件为:pH 7,摇床转速150r/min,温度30℃,发酵时间48h。在最优条件下发酵,HZY-23菌株发酵液中的芽孢数量达到6.6×10⁸CFU/mL。