【摘 要】
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目的:利用顺铂诱导肾小管上皮细胞发生凋亡,研究中药阿魏酸钠对肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨阿魏酸钠对顺铂引起的肾毒性的保护机制,为临床顺铂肾毒性的治疗提供理论基础。
【机 构】
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四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室、肾脏内科; 四川省交通厅公路局医院内科;
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目的:利用顺铂诱导肾小管上皮细胞发生凋亡,研究中药阿魏酸钠对肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨阿魏酸钠对顺铂引起的肾毒性的保护机制,为临床顺铂肾毒性的治疗提供理论基础。方法:体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白、顺铂诱导,不同剂量的阿魏酸钠保护组,每组设三复孔。选择50uM顺铂作用24小时作为模型,给予不同浓度的阿魏酸钠保护,观察细胞的形态学,流式检测细胞凋亡率,TUNEL验证细胞凋亡,免疫组化和RT-PCR 检测Bax,Bcl-2蛋白和mRNA的表达。结果:①．与对照组相比,顺铂诱导发生了明显的肾小管上皮细胞凋亡,DAPI染色出现了核固缩,核碎裂,TUNEL证实了细胞凋亡的存在,流式Annexin-V-PI 凋亡率增加(P<0．05)。免疫组化观察Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0．05),RT-PCR 检测Bax的mRNA上调,Bcl-2的mRNA下调(P<0．05)。②．与对照组和顺铂诱导组相比,从形态学和流式细胞术观察到不同浓度的阿魏酸钠保护组明显抑制了顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡: 免疫组化观察发现Bax表达下调,Bcl-2表达上调(P<0．05),RT-PCR检测到Bax的mRNA下调, Bcl-2的mRNA上调(P<0．05)。结论:①．顺铂时间剂量依赖性诱导肾小管上皮细胞凋亡:②．不同浓度的阿魏酸钠对细胞凋亡有明显的抑制作用。③．阿魏酸钠对顺铂诱导的细胞凋亡的抑制机制是通过下调bax,上调bcl-2来调控。
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