【摘 要】
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铜绿丽金龟(Anomala corpulenta)是我国重要的农业害虫,成虫具有明显的寄主植物选择习性,解析铜绿丽金龟识别寄主植物的嗅觉机制可为其绿色防治奠定基础。本文首先利用昆虫触
【机 构】
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中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室; 湖北大学生命科学学院;
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铜绿丽金龟(Anomala corpulenta)是我国重要的农业害虫,成虫具有明显的寄主植物选择习性,解析铜绿丽金龟识别寄主植物的嗅觉机制可为其绿色防治奠定基础。本文首先利用昆虫触角电位仪检测了铜绿丽金龟触角对170种寄主植物挥发物的电生理反应,结果表明,水杨酸甲酯、丙烯酸-2-乙基己酯、α-丁香酚、乙酸龙脑酯、异戊醛等共31种化合物均能强烈引起铜绿丽金龟触角的电生理反应;设计引物,克隆了铜绿丽金龟的气味结合蛋白OBP7的全长编码基因,OBP7全长375bp,编码124个氨基酸;连接pET30载体后在BL21 (DE3)细胞进行原核表达,通过2次镍柱纯化获得13.8ku的蛋白,利用rEK切除了重组蛋白上的his标签;纯化后的蛋白利用荧光竞争结合实验,探究了其对昆虫触角电位实验筛选出的31种活性化合物的亲和特性,结果表明,铜绿丽金龟气味结合蛋白OBP7对水杨酸甲酯、α-丁香酚、乙酸龙脑酯等植物挥发物结合能力较强,竞争解离常数Ki分别为16.94μmol/L、18.05μmol/L和19.40μmol/L,推测该蛋白在铜绿丽金龟对寄主植物的嗅觉识别过程中发挥着重要作用。
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