【摘 要】
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为探讨miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,通过化学合成的miR-23b-3p模拟物mimic和抑制物inhibitor成功转入3T3-L1前脂肪细胞后,利用CCK-8法和流式细胞术检测miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞周期基因CyclinD1和CDK4以及成脂标志基因PPARY和FABP4的表达
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广州510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会
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为探讨miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,通过化学合成的miR-23b-3p模拟物mimic和抑制物inhibitor成功转入3T3-L1前脂肪细胞后,利用CCK-8法和流式细胞术检测miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞周期基因CyclinD1和CDK4以及成脂标志基因PPARY和FABP4的表达情况,以及油红O染色测定甘油三酯积累情况。过表达miR-23b-3p能够抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,导致细胞G1期阻滞,CyclinD1、CDK4在mRNA和蛋白质水平极显著下调；抑制miR-23b-3p的表达能够促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,G1期细胞数量减少,CyclinD1、CDK4在mRNA和蛋白质水平显著或极显著上调。在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中,miR-23b-3p的表达上调；过表达miR-23b-3p能够促进3T3-L1前脂肪细胞甘油三酯积累,PPARγ和FABP4在mRNA和蛋白质水平显著或极显著上调；抑制miR-23b-3p的表达能够抑制3T3-L1前脂肪细胞甘油三酯积累,PPARγ和FABP4在mRNA和蛋白质水平极显著下调,表明miR-23b-3p抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖并促进其分化为成熟脂肪细胞。
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