【摘 要】
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目的:探讨乳腺上皮干细胞相关表型标记CK5、CK8及BCRP蛋白在乳腺上皮良、恶性增生病变中的表达情况,追踪干细胞相关表型在肿瘤组织中的演变情况,阐明其表达特点及意义。方法:采用免疫细胞化学方法检测人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中BCRP的表达情况,用Hoechst33342染色MCF-7细胞,计算染色阴性(SP)细胞比率,比较BCRP的表达与SP细胞的关系。免疫组织化学方法检测CK5、CK8及BC
【机 构】
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大连医科大学中日临床病理中心 大连 116027
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目的:探讨乳腺上皮干细胞相关表型标记CK5、CK8及BCRP蛋白在乳腺上皮良、恶性增生病变中的表达情况,追踪干细胞相关表型在肿瘤组织中的演变情况,阐明其表达特点及意义。
方法:采用免疫细胞化学方法检测人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中BCRP的表达情况,用Hoechst33342染色MCF-7细胞,计算染色阴性(SP)细胞比率,比较BCRP的表达与SP细胞的关系。免疫组织化学方法检测CK5、CK8及BCRP在89例乳腺组织(正常乳腺组织13例,乳腺增生病16例,导管上皮非典型增生12例,导管原位癌6例,浸润性导管癌42例)中的表达情况,并分析三者之间的相关性。RT-PCR方法检测37例乳腺病变(包括乳腺增生症4例,浸润癌27例,癌旁组织6例)中BCRP mRNA的表达水平。
结果:MCF-7细胞中BCRP的阳性表达与SP细胞计数存在显著相关性;BCRP在乳腺正常组织、增生、非典型增生、浸润癌组织中的表达逐渐增多,在正常组织和增生组织中的表达与浸润癌组织中的表达存在差异,(P<0.05);BCRP mRNA在乳腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01);CK5和CK8在正常乳腺组织、乳腺增生病、非典型增生及乳腺癌中的阳性率呈下降趋势,且存在明显差异(p<0.05),在部分乳腺浸润性导管癌中,CK5阳性染色主要集中在外层尚未浸润的基底层细胞中,表达的完整性和连续性程度不一,而在肿瘤细胞中没有表达或很少表达,而CK8的表达与CK5恰好相反,即CK8主要在肿瘤细胞中表达,而在基底层细胞中完全不表达。绝大多数浸润性导管癌细胞呈CK5-/CK8+表型。
结论:MCF-7细胞中有SP细胞,SP细胞排除Hoechst33342与BCRP表达有关,但其阳性表达率高于SP细胞量,故不能认为BCRP阳性表达细胞就是SP细胞;CK5和CK8联合使用可用于对乳腺干/前体细胞分化表型的研究,CK5+细胞中存在干细胞。
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