【摘 要】
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目的 植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 (LOX-1)是人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)摄取的主要受体.我们的前期工作发现雷帕霉素能够抑制HUVECs中ox-LDL聚集,其效应与雷帕霉素增加了自噬-溶酶体活性有关.本研究旨在探讨雷帕霉素能否减少HUVECs对ox-LDL的摄取,并且探讨其中的机制.方法 通过流式细胞技术检测细胞内Dil标记ox-LDL (Dil
【机 构】
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苏州大学附属第二医院内分泌科 苏州大学附属第二医院神经内科
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目的 植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 (LOX-1)是人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)摄取的主要受体.我们的前期工作发现雷帕霉素能够抑制HUVECs中ox-LDL聚集,其效应与雷帕霉素增加了自噬-溶酶体活性有关.本研究旨在探讨雷帕霉素能否减少HUVECs对ox-LDL的摄取,并且探讨其中的机制.方法 通过流式细胞技术检测细胞内Dil标记ox-LDL (Dil-ox-LDL)含量,活细胞工作站动态观察Dil-ox-LDL进入HUVECs过程,实时定量PCR技术及免疫印迹技术检测细胞LOX-1基因及蛋白含量,免疫印迹技术检测细胞mTOR、p70s6k磷酸化水平.结果 流式细胞术及活细胞工作站结果提示雷帕霉素能够抑制HUVECs对Dil-ox-LDL的摄取.雷帕霉素能够减少ox-LDL诱导的LOX-1基因及蛋白表达.免疫印迹结果表明雷帕霉素能够抑制ox-LDL诱导的HUVECs哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)、p70s6k磷酸化.免疫印迹及流式细胞术结果表明敲减mTOR能够抑制ox-LDL诱导的HUVECs LOX-1蛋白表达上调,并显著抑制ox-LDL被摄取进入HUVEC.结论 雷帕霉素能够抑制HUVECs对ox-LDL的摄取,该作用与其抑制mTOR磷酸化,进而抑制LOX-1的表达有关.
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