【摘 要】
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通过细菌内同源重组的方法,成功构建了以口蹄疫病毒2A基因为linker的共表达H1N1与H3N2亚型猪流感病毒血凝素的重组腺病毒。将H1N1 HA1-2A基因及H3N2 HA1基因亚克隆到穿梭载体
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通过细菌内同源重组的方法,成功构建了以口蹄疫病毒2A基因为linker的共表达H1N1与H3N2亚型猪流感病毒血凝素的重组腺病毒。将H1N1 HA1-2A基因及H3N2 HA1基因亚克隆到穿梭载体质粒pAdTrack-H1-2A-H3。得到的重组质粒转化至BJ5183感受态细胞,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAd-H1-2A-H3-GFP,将该质粒转染293T细胞进行包装。根据报告基因GFP的表达及PCR鉴定,证明H1N1与H3N2亚型猪流感病毒HA基因已经重组到腺病毒的基因组中。而且以所获得的重组腺病毒免疫小鼠,能够同时对H1和H3亚型SIV的攻击提供有效保护。
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