【摘 要】
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利用RT-PCR技术扩增出岭南黄鸡γ干扰素(IFN-γ)基因,将其克隆到pMD18-T载体上,并进行序列测定.再将克隆的IFN-γ基因插入到pET-32a质粒中构建原核表达载体,将其转化到Origam
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东广州,510642
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利用RT-PCR技术扩增出岭南黄鸡γ干扰素(IFN-γ)基因,将其克隆到pMD18-T载体上,并进行序列测定.再将克隆的IFN-γ基因插入到pET-32a质粒中构建原核表达载体,将其转化到Origami(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导获得了预期的表达蛋白,表达的融合蛋白占菌体蛋白的46％.菌体经超声裂解后离心取上清通过镍离子亲和树脂进行了纯化.纯化的蛋白酶切后获得重组鸡IFN-γ,经生物活性的测定表明重组鸡IFN-γ有抗病毒活性.
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