【摘 要】
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采用国际通用形态和生理生化鉴定方法及26S rDNA Dl/D2区序列分析对甘肃部分县市的17份土样中分离到的29株野生酵母菌株进行了鉴定.结果显示:29株酵母可归为10属18个种,其中中国新记录种7个,包括Williopsis californica,Williopsis californica var.dimennae,Cryptococcus aerius,Candida pseudolam
【机 构】
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甘肃农业大学农学院,兰州,730070 山东轻工业学院食品与生物工程学院,济南,250100
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采用国际通用形态和生理生化鉴定方法及26S rDNA Dl/D2区序列分析对甘肃部分县市的17份土样中分离到的29株野生酵母菌株进行了鉴定.结果显示:29株酵母可归为10属18个种,其中中国新记录种7个,包括Williopsis californica,Williopsis californica var.dimennae,Cryptococcus aerius,Candida pseudolambica,Candida fermertati,Hanseniaspora occidentalis,Pichia pijperi.同时对这29株酵母进行了抗性评价.
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PCR扩增了蓝细菌体内偏码ADP-葡萄糖焦磷酸羧化酶(ADPG PPase)的agp基因,通过DNA体外重组,以红霉素抗性基因部分取代agp基因片段,构建了既含agp基因上游及下游序列、又携带选择性标记——红霉素抗生——的pUCAE质粒.该质粒转化野生型集胞藻6803细胞,获得了能在含红霉素的培养基上正常生长的突变株.对该突变株基因组DNA的PCR扩增,结果表明,在agp基因上确实发生了缺失突变.
对漆酶产生菌鸡腿菇C6进行高静水压处理,发现致死率随剂量的增加而增加,在致死率为50％～80％的范围内诱变效果较好.实验获得了一株具有较大应用潜力的鸡腿菇高压突变株C6-203(200MPa处理45min),其酶活比出发菌株提高了256.54％,发酵周期也缩短了1d.
应用低能N+离子束注入红霉素产生菌-红色链霉菌(Streptomyces erythreus)进行诱变选育,结合琼脂块筛选法,经过多轮次诱变筛选,得到高产菌株K79.摇瓶发酵产量由出发菌株的3186u/m1增加到4850u/ml,提高了52.2％.通过对发酵培养基进行了正交试验,在最佳培养基条件下,菌株K79摇瓶产量可达5315u/ml.
离子注入技术近来越来越受到国内外的关注,并被广泛应用于微生物的品种改良.利用N+离子注入法对本实验室保藏的产2,2-二甲基环丙腈水合酶菌种Pseudomonas sp.ZJUT0509进行选育.结果表明,通过离子诱变后的突变株的腈水合酶活性最高可达原始菌株的9倍.对其中F60-4菌种进行产酶条件的优化,其最佳碳、氮源及其用置分别是葡萄糖,2g/l和酵母粉,10g/l,最适初始pH值为6.5,最适发
γ-聚谷氨酸是一种可以通过微生物合成的均聚氨基化合物,具有对人体和环境无毒害、生物可降解性好、可食等优点.本文首先使用PCR方法以高产型枯草芽孢杆菌(Balillussubtilis ZJU-7)的基因组DNA为模板,扩增得到目的基因pgsB、pgsC、pgsA,然后将pgsB、pgsC、pgsA基因定向克隆到质粒pXMJ19上,得到同时具有pgsB、pgsC、pgsA基因的重组质粒pXMJ19-
粘细菌是一类复杂的具有多细胞行为的原核生物,属于革兰氏阴性菌.粘细菌能够产生丰富的活性物质,并且具有菌株特异性,为人类不断发现新的活性物质提供了广阔的前景,特别是20世纪90年代发现的纤维堆囊菌产生的埃坡霉素(epothilones)具有极好的抗癌活性,粘细菌再一次受到了科学界的极大关注.虽然对粘细菌的研究已经超过了百年的历史,但是由于粘细菌的特性以及客观因素的限制,粘细菌的筛选、分离工作抑制停留
通过PCR方法定点诱变并扩增得到温度敏感的T4噬菌体溶菌酶基因ets,与表达载体pUC19连接后转化E. coli JM109,得到重组菌株E. coli JM109(pUC19-ets).重组菌在三角瓶中通过添加IPTG诱导后,悬浮于裂解缓冲液buffer TE中,菌体在10min内吸光度由1.75迅速下降到0.25左右,成功实现了可控裂解.将带有SD序列的T4噬菌体溶菌酶基因ets插入pBV-
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