【摘 要】
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本文建立了一种离子键合的毛细管固定化酶微反应器,将其用于黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选研究中。以黄嘌呤氧化酶抑制剂的快速筛选为模型,建立了毛细管电泳-酶抑制剂筛选的研究方
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本文建立了一种离子键合的毛细管固定化酶微反应器,将其用于黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选研究中。以黄嘌呤氧化酶抑制剂的快速筛选为模型,建立了毛细管电泳-酶抑制剂筛选的研究方法。探索了在毛细管电泳条件下进行酶抑制剂筛选的最佳方案,通过缩短毛细管管长,降低毛细管管径,以及优化电压条件,调整进样时间,降低进样量等条件的优化,达到了黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶及其产物的最佳分离优化条件。同时,通过在毛细管电泳条件下的研究,使酶用量大大降低,分析时间大大缩短,分离效果显著增强,拓展高效毛细管电泳的使用范围。运用此方法,通过对毛细管电泳条件下各实验参数的考察和优化,用已知的酶抑制剂对所建立的筛选方法进行验证,并将其应用于中药粗提物—黄柏中黄嘌呤氧化酶抑制剂的快速筛选,进一步验证了在毛细管电泳环境下进行酶抑制剂筛选研究的可行性。同时,由于在短毛细管电泳条件下,样品用量大大减少。
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