多层自组装毛细管固定化酶微反应器的制备及在黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选中的应用

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本文建立了一种离子键合的毛细管固定化酶微反应器,将其用于黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选研究中。以黄嘌呤氧化酶抑制剂的快速筛选为模型,建立了毛细管电泳-酶抑制剂筛选的研究方法。探索了在毛细管电泳条件下进行酶抑制剂筛选的最佳方案,通过缩短毛细管管长,降低毛细管管径,以及优化电压条件,调整进样时间,降低进样量等条件的优化,达到了黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶及其产物的最佳分离优化条件。同时,通过在毛细管电泳条件下的研究,使酶用量大大降低,分析时间大大缩短,分离效果显著增强,拓展高效毛细管电泳的使用范围。运用此方法,通过对毛细管电泳条件下各实验参数的考察和优化,用已知的酶抑制剂对所建立的筛选方法进行验证,并将其应用于中药粗提物—黄柏中黄嘌呤氧化酶抑制剂的快速筛选,进一步验证了在毛细管电泳环境下进行酶抑制剂筛选研究的可行性。同时,由于在短毛细管电泳条件下,样品用量大大减少。
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