【摘 要】
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目的：构建含有埃博拉出血热病毒(EHFV)小片段分泌蛋白S基因，马尔堡出血热病毒(MHFV) GP基因，辛诺柏病毒(SNV) G2糖蛋白基因及非洲欧尼恩病毒(ONNV) E2蛋白基因的重组痘苗病毒。方法：设计含EGFP筛选标记和四种外源基因的穿梭质粒，并利用同源重组技术、荧光筛选技术和Cre/LoxP敲除系统，最终获得四联重组痘苗病毒。使用PCR方法鉴定重组痘苗病毒及其遗传稳定性。用透射电镜观察病
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春,130122
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会
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目的：构建含有埃博拉出血热病毒(EHFV)小片段分泌蛋白S基因，马尔堡出血热病毒(MHFV) GP基因，辛诺柏病毒(SNV) G2糖蛋白基因及非洲欧尼恩病毒(ONNV) E2蛋白基因的重组痘苗病毒。方法：设计含EGFP筛选标记和四种外源基因的穿梭质粒，并利用同源重组技术、荧光筛选技术和Cre/LoxP敲除系统，最终获得四联重组痘苗病毒。使用PCR方法鉴定重组痘苗病毒及其遗传稳定性。用透射电镜观察病毒形态。结果：PCR鉴定结果表明，成功构建了重组痘苗病毒rVTT-J-4+，并具有良好的遗传稳定性；电镜观察结果表明，痘苗病毒中缺失TJ2R基因的同时插入四种外源基因未影响病毒形态。结论：本实验所构建的多联重组痘苗病毒rVTT-J-4+具有良好的遗传稳定性，并且具备痘苗病毒的完整形态。最终成功构建含有四种外源基因的重组痘苗病毒rVTT-J-4+，为后续多联疫苗的研究奠定了基础。
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