【摘 要】
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本实验中将一端巯基修饰的具有发夹结构的DNA 探针用于完全互补以及单 碱基错配基因序列的区分检测。当发夹结构的固定探针与待测体系作用后,进行 酶切反应及金标探针放大。其特点在于结合使用限制性核酸内切酶ECoR I 及纳 米金标记的检测探针,能够很好的降低背景值并有效增强信号。实验中所设计的 发夹状结构固定探针,环状部分的互补序列与待测目标序列一致,发夹分子的茎 部有8 个碱基对互补并可以被ECoR
【机 构】
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宁夏大学化学化工学院能源化工重点实验室,银川 750021 化学生物传感与计量学国家重点实验室湖南
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本实验中将一端巯基修饰的具有发夹结构的DNA 探针用于完全互补以及单 碱基错配基因序列的区分检测。当发夹结构的固定探针与待测体系作用后,进行 酶切反应及金标探针放大。其特点在于结合使用限制性核酸内切酶ECoR I 及纳 米金标记的检测探针,能够很好的降低背景值并有效增强信号。实验中所设计的 发夹状结构固定探针,环状部分的互补序列与待测目标序列一致,发夹分子的茎 部有8 个碱基对互补并可以被ECoR I 特异性识别切割。在结合目标链打开以后 可以进一步和检测探针杂交(二者互补)。通过这一巧妙设计,实现了对目标DNA 用压电方法的检测,而且对错配的目标序列能够有效的区分,顺利实现最初的设 计思路。对一系列不同浓度的目标DNA 进行测试并得到其浓度校正曲线,结果表 明压电石英晶振频率变化与目标DNA 浓度在2-300pM 之间具有较好的相关性,该 方法检测限为2pM。实验结果表明,此方法是一种简单实用、价格低廉、灵敏度 高的适用于DNA 分析检测的技术。
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