【摘 要】
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以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为试验动物,采用细菌常规培养与PCR-DGGE技术,研究了投喂硫酸安普霉素(apramycin sulphate)对凡纳滨对虾肠道细菌数量及群落结构的影响,为硫酸安普霉素对凡纳滨对虾生理生化效应的影响及其在对虾肠炎病防治中的安全性评价提供理论依据.选用初始体重为(0.51±0.01)g的凡纳滨对虾,随机分为6组,分别投喂添加0mg/kg、60
【机 构】
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广东省农业科学院畜牧研究所,广东省动物育种与营养公共实验室,广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广州 510640;华中农业大学水产学院,武汉430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会
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以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为试验动物,采用细菌常规培养与PCR-DGGE技术,研究了投喂硫酸安普霉素(apramycin sulphate)对凡纳滨对虾肠道细菌数量及群落结构的影响,为硫酸安普霉素对凡纳滨对虾生理生化效应的影响及其在对虾肠炎病防治中的安全性评价提供理论依据.选用初始体重为(0.51±0.01)g的凡纳滨对虾,随机分为6组,分别投喂添加0mg/kg、60mg/kg、120mg/kg、180mg/kg、240mg/kg和300mg/kg硫酸安普霉素的饲料,记为G0、G60、G120、G180、G240和G300.养殖49天后分离对虾肠道,测定细菌数量与群落结构.细菌常规培养结果显示,投喂硫酸安普霉素能降低对虾肠道细菌总数(Total bacteria count),其中G300显著低于对照组(P＜0.05).各添加组对虾肠道中弧菌(Vibrio)数量均低于对照组,其中G240较对照组下降3.9％(P＜0.05).投喂硫酸安普霉素对凡纳滨对虾肠道乳酸菌(Lactobacillus)与双歧杆菌(Bifidobacterium)数量的影响不显著(P＞0.05),但后者表现出随硫酸安普霉素添加量的升高而降低的趋势.应用PCR-DGGE技术检测到凡纳滨对虾肠道中共有10条较明显的种/属菌16S rDNA条带,分别属于拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Phylum firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria).其中对照组条带数最多,为10个条带,条带数最少的是G300,为7个条带.通过软件Quanity one 4.6.2分析可知,相似性系数(CS)与多样性指数(DI)在G300达到最低值,相似性系数为72.3％,多样性指数为1.49,而对照组为1.79 (P ＜0.05).两指标均随着硫酸安普霉素添加量的升高而降低.各条带测序结果经NCBI Blast比对,6个处理组共有条带为黄杆菌(Flavobacterium)、不动杆菌(Acinetobacter)、海洋芽孢杆菌(Bacillus marinus)、未培养的梭菌(Uncultured Clostridium)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、沙雷氏菌(Serratia).与对照组相比,各硫酸安普霉素添加组均未检出气单胞菌(Aeromonas).同时,G120未检出葡萄球菌(Staphylococcus),G240未检出溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus),G300未检出溶藻弧菌、创伤弧菌(Vibrio vulnificus).结果表明,投喂硫酸安普霉素对凡纳滨对虾肠道微生物数量与群落结构均会产生一定影响.随着硫酸安普霉素添加量的增加,不同程度降低了对虾肠道中细菌总数与弧菌数量,减少了对虾肠道中气单胞菌和弧菌的种类.
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