补肾填精中药对化疗源性卵巢早衰大鼠生育力的重塑

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目的:探讨补肾填精法代表方左归丸对化疗源性卵巢早衰模型大鼠生育力的重塑作用,其重塑力可能与补肾填精中药抑制卵巢颗粒细胞凋亡有关。方法:采用128只动情周期规律的雌性SD大鼠,随机分为化疗组(n=80)和非化疗组(n=48),每组16只SD雌性大鼠。其中化疗组分为5组(A:环磷酰胺(CTX)组,B:CTX+GnRHa组,Ca:CTX+左归丸高剂量组,Cb:CTX+左归丸中剂量组,Cc:CTX+左归丸低剂量组);非化疗组分为3组(D:空白对照组,E:左归丸组,F:GnRHa组)。造模前10天:B、F组分别肌肉注射GnRha(醋酸曲普瑞林,达菲林),其余各组注射同等剂量生理盐水。造模:化疗各组分别腹腔注射CTX,首剂量50mg/kg,维持剂量5mg/kg,连续15d。非化疗各组腹腔注射生理盐水,1ml/d,连续15d。造模成功后,Ca组、Cb和E组、Cc组分别以左归丸(高、中、低剂量灌胃),连续灌胃30天、60天。其余各组以同等剂量过滤水灌胃。分别于30天、60天,每组随机各选取8只,以雌:雄=2:1比例交配合笼,观察各组受孕时间、受孕率、胚胎数目;于30天、60天,每组余下8只,分别眼眶取血留取血清,测定各组血清FSH、E2;取子宫、卵巢组织,测定子宫及卵巢指数,Western Blot法测定各组卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Cyt-c蛋白表达水平,免疫组化法测定卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Cyt-c蛋白表达部位及水平。结果:造模结束后30天、60天,化疗组受孕时间较非化疗组延长,受孕率均低于非化疗组,胚胎数目少于非化疗组。化疗组子宫及卵巢指数均低于化疗组,差异有统计学意义。化疗组中:GnRHa组、中药组受孕时间较模型组短,受孕率均高于模型组,胚胎数目与模型组无明显差异。GnRHa组、中药组大鼠子宫及卵巢指数高于模型组,差异有统计学意义。GnRHa组与中药各组受孕时间、受孕率及胚胎数目之间无明显差异。GnRHa组与中药组大鼠子宫及卵巢指数差异无统计学意义。(各组血清FSH、E2测定水平,及卵巢Bcl-2、Bax、Cyt-c蛋白表达情况数据详见论文)。结论:补肾填精中药代表方左归丸对化疗源性卵巢早衰大鼠生育力有一定重塑作用,其原因可能与抑制卵巢颗粒细胞凋亡有关。
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