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目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)抑制低氧诱导肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖的作用及机制.
方法:分离并培养原代大鼠PASMCs,α-SMA细胞免疫荧光染色对细胞进行鉴定,取第3-8代用于后续实验.(1)观察低氧对PASMCs增殖的影响:PASMCs分为常氧组及低氧组,低氧组给予3％O2低氧0～72h,MTS法检测细胞增殖情况.(2)观察EGCG对PASMCs活力影响:不同浓度EGCG(0、1、5、25、50、100μM)孵育PASMCs 48h,MTS法检测细胞活力.(3)不同浓度EGCG(0、1、5、25、50μM)预孵育PASMCs 1h后低氧48h,MTS及Edu法检测细胞增殖情况.(4)50μM预孵育PASMCs 1h后低氧不同时间(6、12、24、48、72h),MTS及Edu法检测细胞增殖情况.
结果:培养的细胞a-SMA免疫荧光染色阳性，阳性率达99.9%。3%O2低氧PASMCs 24h细胞出现明显增殖(p<0.05)，48h增值幅度最大(P<0.01)。100哪EGCG能显著抑制PASMCs细胞活力(P<0.05)，50州EGCG对PASMCs细胞活力无显著影响(P>0.05)。EGCG能浓度依赖性地抑制低氧诱导的PASMCs增殖(P<0.05)。EGCG能时间依赖性地抑制低氧诱导的PASMCs增殖(P<0.05)。
结论:EGCG能抑制低氧诱导PASMCs增殖，其具体机制还需进一步研究。