【摘 要】
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猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的主要致病菌.毒力相关因子在支原体的感染与致病中扮演着十分重要的角色,但目前对毒力因子知之甚少.本研究通过对感染前后猪肺炎支原体168 强毒株进行差异蛋白质组学分析,筛选出一些可能的毒力因子.试验首先用猪肺炎支原体168 强毒株体外感染猪气
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;山西农业大学动物科技学院,山西太谷,030801
【出 处】
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江苏省畜牧兽医学会2017年学术年会
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猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的主要致病菌.毒力相关因子在支原体的感染与致病中扮演着十分重要的角色,但目前对毒力因子知之甚少.本研究通过对感染前后猪肺炎支原体168 强毒株进行差异蛋白质组学分析,筛选出一些可能的毒力因子.试验首先用猪肺炎支原体168 强毒株体外感染猪气管上皮细胞(STEC),根据上清支原体含量来筛选出适宜的感染时间.结果显示,与其他感染条件相比,感染剂量为1×108,感染时间为48h 时上清中支原体含量最多.根据筛选出的感染剂量及感染时间进一步感染,利用双向电泳技术(Two-dimensionalElectrophoresis,2-DE)对感染前后的全菌蛋白进行分离,PDQuest V8.0 软件对扫描所得图像进行分析(T 检验法,差异＞1.5 倍),强毒株感染组与对照组蛋白点进行比对分析后,发现了11 个差异蛋白,经过质谱鉴定7 个为支原体蛋白,其中3 个只出现在感染组中,4 个在感染后表达上调.从这些差异蛋白点中选择了甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)进行了Western-blot 验证,结果显示,GAPDH 蛋白在强毒株感染后表达上调,与双向电泳结果一致.
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