基于转录组测序技术对电针调节2型糖尿病小鼠血浆外泌体CircRNA的作用机制研究

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目的:研究电针对2型糖尿病小鼠血浆外泌体circRNA表达和信号通路的影响。方法:将C57BL/6小鼠随机分为正常组(N)、模型组(M)和模型+电针组(M+EA)。M组及M+EA组先予以高脂饮食6周,之后注射链脲佐菌素(STZ)。电针组双侧"足三里"、"脾俞"穴,自高脂饮食4周后开始,每次15min,隔日1次,一周三次,共四周。对各组切片行TUNEL凋亡率对成模情况进行评价。采用超速离心法提取小鼠血浆外泌体对其进行透射电镜鉴定等。应用RNA-seq技术对各组小鼠血浆外泌体进行转录组测序。结果:(1)M组、M+EA组同N组比较凋亡率,结果有显著性差异(P=0.001;P=0.014)。说明造模后细胞凋亡较显著。M+EA组与M组比较也有显著性差异(P=0.001),这说明电针能显著改善凋亡率。(2)通过透射电镜测定的小鼠血浆外泌体大小介于70到200nm之间,且呈茶托状的囊泡状结构。(3)RNA-seq结果显示,电针后甲状腺激素信号通路上的某些circRNA表达上调(MED13、MED13L、NCOA2、PIK3CB、SLC16A10),而某些circRNA(MED12L、PLCG2、PRKCA、TSC2)表达下调;电针后呈表达显著下调的circRNA中的CIRCpedia31003预测与miRNA中的miR-7092-3p靶向结合,该分子位于磷脂酰肌醇信号通路(Phosphatidylinositol signaling system)上。结论:(1)造模对小鼠胰岛破坏影响比较大,细胞凋亡较显著,电针干预能显著改善凋亡,维持胰岛结构的完整性,保护胰岛功能;(2)造模后2型糖尿病小鼠血浆外泌体circRNA表达谱发生变化;(3)电针对甲状腺激素信号通路的调节非常活跃。
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