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水稻转基因的方法有:电穿孔转化,PEG介导的转化,基因枪转化和农杆菌介导的转化。在这些转化方法中,农杆菌介导的转化法最具优势,它不仅具有转化频率高,转化拷贝数低,还可以实现较大的片段的转化,在整合过程中发生重排的儿率低等优点。水稻有粳稻和籼稻两个亚种,籼稻种植面积约占整个水稻生产面积的70%,比粳稻有着更重要的地位。粳稻的成熟胚诱导愈伤组织采用农杆菌介导遗传转化在1994年已经被建立,至今仍广泛地被应用,而籼稻的愈伤组织难以培养,遗传转化效率低,而且还受基因型限制,是长期以来困惑籼稻遗传转化的难题。最近,虽然有文献报到建立了适合籼稻的组织培养系统(Ge et al.,2006),验证实验显示利用此培养系统诱导和继代的愈伤组织质量远不如粳稻愈伤组织质量,受不同基因型的限制,转化效率也不高,表明籼稻的成熟胚-愈伤组织-农杆菌转化途径仍然是一个没有解决好的难题。水稻农杆菌转基因技术所发表的文章中只有不到5%是利用籼稻作为遗传转化受体材料。针对籼稻高效遗传转化技术存在的问题,我们从培养基设计入手,历时3年的比较研究,设计出全新的培养基LY,用LY培养基培养的籼稻愈伤组织质量与N6培养基培养的粳稻愈伤组织质量相当。与MS、N6、S(Ge et al.,2006)培养基相比,LY培养基对于籼稻愈伤组织的生长有明显地促进作用;其他条件相同的情况下,籼稻愈伤组织在LY培养基中生长率比在MS、S培养基中高30-40%,比N6培养基高20-30%。LY培养基适用于籼稻遗传转化的各个环节,从诱导,继代,共培养,筛选一直到分化。我们测试了9311、粤泰A、粤泰B、珞恢9号、明恢63、94D-22、IR40931、kasalath、IR64、DML105、FR13A、Goda、E32、鄂早18、5-34、浙733、宝大粒、pid、广粘63S、武香S、Y58S-1、天源6S、9802 S、培矮64 S、江-S、显矮s、GD-1S等40个籼稻基因型,它们的愈伤组织的分化率为80%-100%。LY培养基也适合长时间的愈伤组织继代培养,已继代培养9个月的9311愈伤组织仍然能实现100%的分化率。农杆菌介导的遗传转化率达到或超过粳稻的转化率,所测试的24个籼稻基因型的遗传转化效率达到20-50%。