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目的：GloboCan 2012 数据显示肝癌(HCC)居恶性肿瘤死因的第二位.目前临床常用的治疗手段,如手术治疗和放疗、化疗的总体效果均不理想,而我国传统医药在治疗HCC上颇有成效.中医学者大多认为“治肝必治络”,虫类中药具有入络攻坚化积的抗癌作用.但因虫类中药成分复杂,目前尚未建立公认而有效的高通量体外筛选模型.因此,前期课题组以中药归经理论为指导,进行了不同归经中药干预肝癌HepG2 细胞的体外实验,结果表明归肝经与抗肝癌趋向作用相关.为验证“归经”理论对指导抗肝癌中药(或有效成分)靶向性和高效筛选的可行性,本文以全蝎、蜈蚣、土鳖虫和水蛭蛋白的水提物为研究对象,研究了归肝经虫类中药对人肝癌HepG2 细胞增殖抑制作用的影响,并初步探讨其可能分子机制.方法：采用液氮快速冻融法,丙酮沉淀的方法制备各药水提物.采用MTT 法检测四种药物对HepG2 细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期,吖啶橙/溴乙锭﹙AO/EB﹚荧光染色法观察细胞凋亡形态,RT-PCR 及免疫组化法检测癌基因C-myc、N-ras 和抑癌基因PTEN、p53 的表达.结果：四味归肝经虫类中药均以剂量依赖性方式抑制HepG2 细胞增殖,增殖抑制率随提取物药液浓度增高而增加.与对照组比较,全蝎蛋白水提物能够下调HepG2 细胞N-rasmRNA,上调PTEN mRNA的表达(P 均＜0.01),蜈蚣蛋白水提物可下调HepG2 细胞C-myc、N-ras mRNA 的表达,上调PTEN mRNA 的表达(P 均＜0.01),土鳖虫蛋白水提物能够下调C-myc mRNA 的表达(P＜0.01),水蛭蛋白水提物可下调C-myc、N-ras、p53 mRNA 的表达水平(P 均＜0.01).结论：(1)以归经理论为指导筛选具有抗肝癌作用的中药有效成分具有可行性.(2)归肝经虫类药全蝎、蜈蚣、土鳖虫、水蛭蛋白水提物体外抗肝癌HepG2 细胞作用有差别,攻毒散结归肝经的全蝎、蜈蚣抗肝癌作用要优于破血归肝经的土鳖虫、水蛭.(3)通过调控癌相关基因C-myc、N-ras、p53 和PTEN mRNA 的表达,从而抑制肝癌细胞的增殖或促凋亡,可能是归肝经虫类中药抗肝癌的重要分子机制.