诺如病毒34601株VP1基因在昆虫细胞sf9中表达及抗原性鉴定

来源 :首届传染病防控基础研究与应用技术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flyskyxun
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目的:利用杆状病毒表达系统对诺如病毒GII-4基因型毒株34601株VP1基因进行表达,并利用Western-blotting进行抗原性分析。方法:以PCR法扩增VP1全长基因,并将其克隆到pFastBac1载体中,通过转化E.coli DH10Bac筛选阳性克隆,抽提到重组VP-1Bacmid。以VP1-Bacmid经Cellfectin介导转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒,扩增后感染st9细胞表达VP1蛋白,并以SDS-PAGE进行鉴定。利用Western-blotting对表达的蛋白进行抗原性鉴定。结果:获得含VP1全长基因的重组杆状病毒。经SDS-PAGE电泳分析确定VP1基因的表达,相对分子质量(Mr)约为?的衣壳蛋白。利用抗VA387株病毒样颗粒抗体进行的Western-blotting分析表明,杆状病毒表达的34601株衣壳蛋白具有一定抗原性,为开展诺如病毒免疫学实验提供基础。
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