【摘 要】
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应用PCR方法，分别扩增出流行性乙型脑炎病毒(JEV)E基因的JEN及JEC片段，经克隆鉴定后，与PET-28a表达载体连接，构建了重组表达质粒PET28a-JEN，PET-28a-JEC，经酶切和测序鉴定正确后，转化到大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导表达，进行SDS-PAGE分析.结果显示，分别成功构建了重组表达质粒PET-28a-JEN，PET-28a-JEC，测序结果表明插入片度分
【机 构】
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军事医学科学院11所 全军基因工程重点实验室,长春 130062 吉林大学农学部,长春 130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会
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应用PCR方法，分别扩增出流行性乙型脑炎病毒(JEV)E基因的JEN及JEC片段，经克隆鉴定后，与PET-28a表达载体连接，构建了重组表达质粒PET28a-JEN，PET-28a-JEC，经酶切和测序鉴定正确后，转化到大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导表达，进行SDS-PAGE分析.结果显示，分别成功构建了重组表达质粒PET-28a-JEN，PET-28a-JEC，测序结果表明插入片度分别为933bp，480bp.含有PET-28a-JEN，PET-28a-JEC重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导后可分别获得高效表达，表达的蛋白分子质量分别约为40Ku和20Ku.该表达产物的稳定高效表达为乙脑的诊断试剂开发提供了依据.
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