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目的:建立药用淫羊藿品种的位点特异性PCR鉴定方法,为药材质量控制提供帮助。
方法:对Gen-Bank上淫羊藿点Epimedium brevicornu Maxim 、箭叶淫羊藿E.sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿E. pu-bescens Maxim、朝鲜淫羊藿E.koreanum Nakai和巫山淫羊藿E.wushanense T.S.Ying.、粗毛淫羊藿E.acumina-turn Franth.、天平山淫羊藿E.myrianthum Steam、黔岭淫羊藿E.leptorrhizum.Steam 等8个药用淫羊藿种的核糖体基因组ITS序列、5S rDNA间隔区序列以及线粒体nadl第2内含子序列进行比对分析寻找能够相互区别的变异位点,并根据这些变异位点设计专属性的PCR鉴定引物对样本进行扩增,并用琼脂糖凝胶电泳进行检测。
结果:序列比对后找到箭叶淫羊藿、朝鲜淫羊藿、粗毛淫羊藿和柔毛淫羊藿的变异位点,但只有朝鲜淫羊藿的变异位点为种特异性鉴定位点。根据朝鲜淫羊藿的特异性位点建立了该种淫羊藿的位点特异性PCR鉴定方法,能够可靠的将朝鲜淫羊藿与其他药用淫羊藿品种鉴别开。