十字花科蔬菜炭疽病菌致病相关基因的筛选与克隆

来源 :中国植物病理学会2011年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:am1047973925
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本研究首先构建十字花科蔬菜炭疽菌突变体库,通过将突变菌株分生孢子接种离体拟南芥叶片,观察叶片第4天发病症状及突变菌株侵染结构的形成,以及观察塑料片上接种的突变菌株分生孢子萌发及附着孢形成情况,初步筛选致病力相关突变株及侵染结构发育异常突变株。筛选程序获得1株附着孢白化突变株CH-1-T734, 1株侵入能力减退突变株CH-1-T45, 3株诱发拟南芥产生过敏性坏死反应突变株CH-1-T679,CH-1-T732和CH-1-T801。通过该筛选程序还发现1株在PDA上产生大量类似厚垣孢子的菌株CH-1-T513。通过Southern blotting验证发现突变体CH-1-T734和CH-1-T732可能是T-DNA单插入引起的突变。CH-1-T513可能是T-DNA克隆了相关突变体的失活基因。双位点插入引起的突变。通过一系列实验研究,推测该基因可能是影响该丝状真菌黑色素生物合成或代谢调控的新基因,在寄主与植物互作的过程中起到信号传递作用。该基因的破坏致使细胞膜内外营养物质和代谢产物转运的紊乱从而导致菌丝体细胞膨大及细胞中代谢器官数量和分布的改变,而这种改变可能并不影响寄主与病原物原有的识别系统。
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