牛传染性鼻气管炎病毒的增殖培养及纯化

来源 :第四届中国牛业发展大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daijiangduck
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[目的]:制备出可用于IBRV检测及单克隆抗体制备所需的抗原。 [方法]:本试验通过将IBRV-oxford标准毒株接种于牛肾细胞(MDBK),30-8h细胞病变达80%时收毒的方法来培养增殖病毒。病毒细胞培养物经反复冻融3次后,4℃5 000 r/min离心30 min,取上清液,用饱和硫酸铵法沉淀病毒,蔗糖浓缩病毒,蔗糖密度梯度法离心得到纯化的病毒。 [结果]:IBRV接种于MDBK后,细胞病变明显,收集的病毒滴度为106.33 TCID50/100μL;纯化的病毒经紫外分光光度计检测,蛋白含量为4.0507mg/ml,血凝试验对小鼠红细胞的凝集效价为1∶256。 [结论]:获得了纯度较高的IBRV,为IBRV检测及单克隆抗体制备提供了抗原。
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