RORγt对急性哮喘小鼠脾源性CD4+T细胞亚群Th17细胞的影响

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<正>目的探讨急性哮喘小鼠脾源性CD4~+T细胞中RORγt表达的变化以及RORγt对急性哮喘小鼠脾源性CD4~+T细胞亚群Th17细胞分化和致炎机能的影响。方法首先研磨小鼠脾脏制成单细胞悬液后裂解红细胞,再予免疫磁珠分离小鼠脾源性CD4~+T细胞,悬于加有胎牛血清的RPMI 1640培养液,加入ConA和PMA刺激培养24小时后行real-time PCR、Western blotting测定小鼠脾源性CD4~+ T细胞亚群Thl7细胞中RORγt的表达,流式细胞仪测定Thl7细胞阳性率,ELISA法检测脾源性CD4~+T细胞培养上清中IL-17的浓度,并分析急性哮喘组小鼠RORγt的表达与Th17细胞阳性率及IL-17浓度的相关性。
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