猪P-gp的组织表达、分布及对伊维菌素跨膜转运的影响

来源 :2016全国兽医学博士生论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wukuang
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  多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)是ATP结合盒(ATP-binding cassette,ABC)膜转运蛋白家族成员之一,在药物代谢动力学及药物之间的相互作用中发挥重要作用.截止目前,没有关于猪P-gp的系统报道.本研究,我们首次克隆了猪P-gp基因全长,在mRNA及蛋白水平检测了其在不同组织的表达及分布,并研究了P-gp对伊维菌素跨膜转运的影响.猪Abcb1基因编码区为3861bp,编码1286个氨基酸,和人具有86%的同源性.进化树分析显示,猪Abcb1与牛、羊Abcb1遗传进化距离最近.qRT-PCR及WB显示P-gp在猪小肠及肝脏高表达.免疫组化显示:P-gp在肝脏主要分布于肝细胞间的胆小管膜:在小肠主要位于肠绒毛上皮细胞顶端及小肠腺腔面上皮细胞顶端.将克隆的猪Abcb1基因转染至MDCK细胞,构建过表达猪P-gp的MDCK-pAbcb1细胞系.利用此细胞系,证明伊维菌素的跨膜转运受P-gp的影响,且伊维菌素是猪P-gp的底物.
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