【摘 要】
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土壤微生物多样性是土壤生态功能的基础.采用间接法提取太湖地区菜地土壤微生物的总DNA,以细菌的特异性引物扩增16SrDNA片段,扩增产物与T-载体酶连,转化大肠杆菌,建立土壤微
【机 构】
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南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,南京,210095南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,南京,210095;中国科学院南京土壤研究所,南京,210008中国科学院南京
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土壤微生物多样性是土壤生态功能的基础.采用间接法提取太湖地区菜地土壤微生物的总DNA,以细菌的特异性引物扩增16SrDNA片段,扩增产物与T-载体酶连,转化大肠杆菌,建立土壤微生物16SrDNA基因文库.PCR扩增基因文库中插入的16SrDNA外源片段,用两种限制性内切酶HhaⅠ和RasⅠ分别酶切,获得该土壤173个克隆的酶切指纹图谱.结果表明,HhaⅠ和RasⅠ联合酶切产生63个基因分型,文库的覆盖度达76.3％,单一酶切产生的基因分型少,但文库的覆盖度高;克隆文库中存在两种优势类群,分别占总克隆的16％和12％;16SrDNA测序结果表明,太湖地区菜地土壤微生物在分类方面主要属于α-和γ-变形杆菌亚门,未培养的微生物类群占有较大的比例.
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