【摘 要】
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利用分子生物学手段获得重组表达抗冻蛋白,通过基因工程方法高效制备高活性重组抗冻蛋白,为抗冻蛋白开发应用提供依据。通过PCR获得抗冻蛋白DNA序列,经无缝克隆--XhoI将抗冻
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利用分子生物学手段获得重组表达抗冻蛋白,通过基因工程方法高效制备高活性重组抗冻蛋白,为抗冻蛋白开发应用提供依据。通过PCR获得抗冻蛋白DNA序列,经无缝克隆--XhoI将抗冻蛋白重组基因(SF-P)插入到大肠杆菌表达质粒PET28A-HS中,构建重组表达质粒PET28A-HS-SF-P,并转化至BL21(DE3)大肠杆菌菌株,经IPTG诱导表达、抗性筛选成功获得抗冻蛋白表达的重组菌株。经过镍琼脂糖亲和层析、Sumo酶切后制备得到重组表达抗冻蛋白,抗冻活性显示SF-P对乳酸菌具有较强的冷冻保护活力,具有明显的冰晶抑制活性和一定的热滞活性。本研究结果可为抗冻蛋白工业化应用提供一定理论参考。
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