miRNA-9抑制神经母细胞瘤增殖、侵袭转移和血管生成的作用及机制研究

来源 :第三届全国小儿实验外科与临床新技术学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong475
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  目的:微小RNA(miRNA)是一类长约22 核苷酸的非编码的单链RNA 分子,能通过不完全的碱基互补结合至靶标mRNA 的3-非翻译区(3-UTR),介导特异靶标的转录后基因沉默。本研究旨在探讨miRNA-9 在神经母细胞瘤恶性进展中的作用及分子机制。方法:运用实时定量PCR、原位杂交方法检测miRNA-9 在神经母细胞瘤组织和细胞株中的表达;采用基因芯片、数据库整合性分析,寻找miRNA-9 下游关键靶基因;运用3-UTR 报告基因检测、western blot、实时定量PCR 方法验证miRNA-9 对靶基因的调控作用;采用软琼脂集落形式实验、划痕迁移实验、Transwell 小室法、内皮细胞小管形成、裸鼠动物实验观测miRNA-9 对神经母细胞瘤细胞体内外增殖、游走和侵袭、血管生成活性的调控作用。结果:miRNA-9 在神经母细胞瘤组织和细胞中表达下调,其表达水平与基质金属蛋白酶14(MMP-14)呈负相关;miRNA-9 能靶向MMP-14 基因3-UTR,抑制其表达水平。过表达miRNA-9 能显著抑制神经母细胞瘤细胞的体内外生长、侵袭转移和血管生成活性,而回补MMP-14 表达水平能有效阻遏miRNA-9 对神经母细胞瘤恶性进展的调控作用。结论:miRNA-9 能通过调控下调MMP-14 基因的表达,阻遏神经母细胞瘤的增殖、侵袭转移和血管生成,有望成为神经母细胞瘤治疗的新靶标。
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