【摘 要】
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根据已发表的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株的序列设计两对引物，以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RNA为摸板，RT—PCR扩增出H基因的939bp、920bp片段和1859bp的H全基因，双酶切两基因片段，以正确的阅读框架定向克隆于PET一28a(+)中，然后将重组质粒转化宿主菌BL21(DE3)plysS，在35℃1.Ommol/LIPTG诱导下获得良好表达，
【机 构】
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云南农业大学动物科学学院 昆明 650021 成都军区疾病预防控制中心 昆明 650032 云南农
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根据已发表的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株的序列设计两对引物，以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RNA为摸板，RT—PCR扩增出H基因的939bp、920bp片段和1859bp的H全基因，双酶切两基因片段，以正确的阅读框架定向克隆于PET一28a(+)中，然后将重组质粒转化宿主菌BL21(DE3)plysS，在35℃1.Ommol/LIPTG诱导下获得良好表达，经SDS—PAGE鉴定，表达的融合蛋白分别约为34KDa，与预期值一致。免疫印迹试验显示，该重组蛋白可被CDV Onderstepoort株多克隆抗体识别，表明该重组蛋白具有天然抗原性。
其他文献
以马铃薯早熟品种费乌瑞它为试验材料,在湖南湘中地区进行了春马铃薯不同播期试验,探讨其对春马钤薯生长与产量的影响。结果表明：(1)湖南春马铃薯不宜过早播种,早播易遭受晚霜危害。(2)湖南春马铃薯的适宜播期为12月中、下旬,此期播种的产量较高(每667 m2为1396.8～1661.6 kg),效益最好(每667 m2为1281.2～2428.6元)。(3)湖南春马铃薯晚播的产量虽高(每667 m2为
宜昌市农业技术推广中心于2008年9～12月在宜昌市东部江汉平原区域的枝江市开展了秋马铃薯栽培的密度试验,其结果表明：每667 m2 6000穴的密度能够以最少的投入得到最大的产投比而获得较高的净收益,是生产商品薯的最佳密度;每667 m2 10000穴的密度投入最多,产量和净收益也最高,但小薯比例高,只能用于种薯扩繁比较合适;若要同时兼顾商品薯和秋薯留种生产,每667 m2 8000穴的密度可以
为了探索广西岩溶大石山地区用马铃薯作为粮食作物来种植,以及用微型薯(MT)作为种薯的可行性,从而解决该贫困山区的粮食自给问题,于1999年至2000年在具有典型卡斯特地貌(岩溶大石山)的广西壮族自治区大化瑶族自治县的七百弄乡弄石屯开展了(1)引进日本中熟的马铃薯品种“西丰”,开展用普通块茎(CT)作种薯(每个约40 g)和用MT作种薯(每个1～3 g)的试验研究;(2)引进8个玉米新品种种植并与当
采用4因素5水平正交旋转组合设计研究了不同尿素、过磷酸钙、硫酸钾施用量及种植密度对优质菜用马铃薯品种紫花851产量的影响。结果表明：4种因素对产量的影响程度的大小依次排序为种植密度>N肥>K肥>P肥。经计算机上模拟寻优,获得了该品种高产栽培教学模型。667 m2高于2361.24 kg的优良组合方案215套,其95％的置信区域是：667 m2种植密度4 930～5 050株,施尿素25.84～27
黑龙江省绥化市永安农场,2004年3月首次将紫黑色马铃薯引入本省并栽培成功。该品种不仅早熟、高产、质佳、味好、淀粉含量极高,而且抗病性特强,适应性广,耐贮耐运,并且是一个集保健、营养、观赏于一体的彩色马铃薯新品种。该品种除具有细腻香面的上佳品质,色泽鲜艳的独特外观之外,又因其富含能够预防癌症、心脑血管疾病、抗衰老、美容等功效的花青素而俏销市场。本文介绍了紫黑色马铃薯的特征特性、食用价值及栽培要点。
稻草覆盖种植马铃薯是源于我国江南冬作区利用水稻冬闲田免耕生产马铃薯的一项新技术。“摆一摆、盖一盖、捡一捡”是这项生产技术的操作要求。将种薯按技术要求处理好后,按品种要求密度摆放在稻田地里,施肥后盖一层10 cm左右厚稻草,马铃薯以稻草为覆土生长。马铃薯成熟时,稻草腐烂,很容易就可以收获马铃薯。受此启发,作者连续三年春季在辽宁兴城进行稻草覆盖种植马铃薯技术的尝试。用于试验的两个品种是当地主栽的“早大
互助县是青海省重要的粮油生产基地和全省最大的马铃薯制种基地,近年来互助县突出特色,坚持以市场为导向,优化种植业结构,本着减粮、增油、扩薯、稳豆,提质增效的思路,大力发展马铃薯生产,初步形成了以干旱浅山为主的马铃薯商品生产基地和以半浅半脑山为主的马铃薯种薯繁殖基地。2007年全县马铃薯种植面积达1.87万hm2,产量和经济效益也不断增加,但是由于群众不重视马铃薯品种保种技术,盲目引进品种进行种植,马
用F81细胞从南京某动物医院所送检的疑似细小病毒(CanineParvovirus，CPV)感染的病犬粪便样品中分离出一株病毒。此毒株在F81细胞上生长，并能产生细胞肿胀、变圆、破碎、脱落等细胞病变，对这株病毒进行病毒形态学、理化学、血凝试验、荧光试验和PCR系统鉴定后，证实分离株是犬细小病毒。
犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)是引起犬传染病的主要病原体，严重危害犬的健康，基因疫苗具有安全和克服幼犬母源抗体对主动免疫干扰的优点。本研究根据CDV的H基因、CPV的VP1基因、犬2型腺病毒(CAV-2)F基因的核苷酸序列，用PCR或RT-PCR方法扩增克隆目的基因，分别构建了pIRCDV-H、p1RESVP1和pcCAV-F三个真核表达质粒并进行了序列验证，用三种
犬传染性气管支气管炎，又称犬窝咳，是指除犬瘟热以外的以咳嗽为特征、具有传染性的犬的呼吸系统疾病的统称。本研究从病原分离研究和临床症状等方面对该病进行研究分析，总结出该病的流行规律和防治效果，为南昌地区该病的防治提供理论和技术方面的支持。