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目的 应用高分辨率熔解曲线实时荧光定量PCR技术建立特异性强、灵敏度高和稳定性好的三重PCR方法，同时快速检测引起人类心内膜炎常见的三种巴尔通体(汉赛巴尔通体、五日热巴尔通体和文森巴尔通体博格霍夫亚种)。方法 应用生物信息学方法查找汉赛巴尔通体、五日热巴尔通体和文森巴尔通体博格霍夫亚种特有基因，从中筛选出各自特有的一段基因序列，设计引物并进行常规PCR扩增，随后将扩增产物连接到pEASY-T5 Zero克隆载体上制备标准品。优化扩增反应的最佳退火温度、引物浓度和熔解速率；评估三重实时高分辨率熔解曲线方法的特异性、敏感性及重复性，并与常规PCR进行比较。