【摘 要】
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目的 本研究利用高脂饮食诱导骨关节炎建模,利用Western-blot 实验技术围绕膝关节OA 处软骨组织中MMP13 蛋白的表达,揭示骨关节炎患处MMP13 蛋白的表达及骨关节炎的产生机理.对揭示高脂饮食诱导的膝关节OA 的发病机制,以及OA 的康复治疗提供理论依据和治疗方案具有重要意义.方法 受试对象为12 只雄性12 周龄C57BL/6J 小鼠,采取两组对照：一组空白组(喂养普通食料),共6
【出 处】
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科学健身与健康中国同行智慧康体促进国际高峰论坛
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目的 本研究利用高脂饮食诱导骨关节炎建模,利用Western-blot 实验技术围绕膝关节OA 处软骨组织中MMP13 蛋白的表达,揭示骨关节炎患处MMP13 蛋白的表达及骨关节炎的产生机理.对揭示高脂饮食诱导的膝关节OA 的发病机制,以及OA 的康复治疗提供理论依据和治疗方案具有重要意义.方法 受试对象为12 只雄性12 周龄C57BL/6J 小鼠,采取两组对照：一组空白组(喂养普通食料),共6 只小鼠；另一组实验组(喂养60 kcal％的高脂食料),共6 只小鼠.喂养小鼠到第八周的时侯,用颈椎脱臼法处死6 只空白组小鼠、6 只实验组小鼠.利用石蜡包埋,切片后进行HE 染色,辨别小鼠是否患膝关节骨关节炎；用Western-Blot 检测蛋白分别检测空白组和实验组膝关节处MMP13 蛋白的表达.结果 高脂饮食实验组小鼠体重持续高于正常饮食空白组小鼠；高脂喂养8 周后,实验组高脂饮食小鼠体重达到(32.17±1.79)g,而正常饮食组小鼠体重仅为(23.97±0.84)g,结果表明高脂饮食以后小鼠体重明显增加.根据空白组小鼠和实验组小鼠的HE 染色显示,空白组小鼠膝关节软骨细胞排列处整齐,软骨组织表面平整,基质染色正常；而实验组小鼠的软骨细胞排列处混乱不整齐,软骨细胞减少发生降解,基质染色不均匀.Western-blot 凝胶图像分析结果,实验组小鼠和空白组小鼠的显影结果横向比较显示,实验组小鼠膝关节MMP13 蛋白表达量大,而空白组小鼠膝关节MMP13 蛋白表达量小.通过测定实验组小鼠和空白组小鼠中实际转到膜上的内参GAPDH 的含量,用空白组小鼠MMP13 蛋白值/空白组小鼠内参(GAPDH)与实验组小鼠MMP13 蛋白值/实验组小鼠内参(GAPDH)比值比较,结果显示实验组小鼠比值明显升高,经统计学计算P＜0.01,具有极其显著性差异,实验组小鼠MMP13 蛋白明显高于空白组小鼠的MMP13 蛋白表达.结论 骨关节炎患处MMP13 蛋白的表达增高,促进了软骨细胞的降解.说明MMP13蛋白是诱导小鼠膝关节骨性关节炎的因素之一.
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