棉花角斑病菌Xcm-V2-18中tal基因的分离与鉴定

来源 :中国植物保护学会2016年年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuaileyt
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  棉花角斑病菌(Xanthomonas campestris pv.malvacearum,Xcm)是野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)致病变种,为我国重要的检疫性病原菌,其引起的棉花角斑病是棉花上重要的细菌病害之一.与其他革兰氏阴性病原菌一样,棉花角斑病菌也可通过高度保守的Ⅲ型分泌系统(type-Ⅲsecretion system,T3SS)分泌效应蛋白(T3SS-secreted effectors,T3SEs)进入寄主植物细胞,在寄主植物上产生抗(感)病反应.T3SEs分为TAL(Transcription activator-like effectors)和Non-TAL的效应蛋白.为了研究Xcm中TAL效应蛋白的数目以及与其对于病原菌毒性的贡献,本研究以Xcm-V2-18为目标菌株,以pthXo1中间重复区的片段为探针,通过Southern杂交鉴定菌株质粒上含有6个tal基因.通过亚克隆,成功分离得到了这6个tal基因的BamHⅠ片段,利用tal基因通用的载体pHM1,构建具有功能的tal融合基因.分别将这6个融合基因导人柑橘溃疡病菌(Xanthomonas campestris pv.citri)tal基因全敲除的049E菌株中,注射接种棉花叶片,发现tale2和tale4在棉花上可以产生致病性的病斑.这些研究结果为揭示Xcm中tal基因的功能提供了线索,也为进一步在棉花上鉴定tal基因靶标的感病相关基因建立了有效的工作体系.
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