RAPD技术在植物乳杆菌N3117酸奶发酵剂检测中的应用

来源 :第十一届乳酸菌与健康国际研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hellojie
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  乳酸菌菌粉作为酸奶发酵剂在乳制品企业中广泛使用,然而对于发酵剂菌种的检测并没有明确的方法,造成菌种开发、发酵剂生产和使用中的出现的染菌、生产性能不稳定等现象不能及时发现,同时带来了安全隐患。因此开发一种能够快速检测发酵剂中菌种的方法具有重大意义。目的:利用RAPD 技术,通过指纹图谱建立快速检测发酵剂植物乳杆菌N3117 的方法,确保发酵剂菌株的纯度及稳定性性。 方法:选取12 个随机引物对植物乳杆菌的N3117 的基因组DNA 进行RAPD 扩增,同时对市售及实验室保存的同源性高的10 株菌的DNA 进行扩增,筛选扩增条带清晰、稳定、多态性好的随机引物作为植物乳杆菌的N3117 的随机引物。然后确定其随机引物PCR 产物琼脂糖凝胶电泳特异图谱,与两个不同生产厂家生产的发酵剂菌株进行对比,判断菌株的稳定性和纯度。结果:通过比较,随机引物1 在N3117 的随机引物扩增中条带清晰、稳定,且与其他同源性高的菌株相比具有特异性条带较多,多态性好,可以作为N3117 检测用引物。利用随机引物1 扩增两个不同生产厂家生产的发酵剂植物乳杆菌N3117 样品及原始菌株的基因组DNA,指纹图谱结果显示两家生产厂家的样品与原始菌株的电泳条带一致。结论:利用RAPD 随机扩增的方法,建立了一种快速检测植物乳杆菌N3117 的方法,该方法可以检测N3117 发酵剂是否存在杂菌,从而确保发酵剂的质量和安全。
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