【摘 要】
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目的:用免疫荧光染色和流式细胞术鉴定出正常人外周血单个核细胞(PBMC)中的滤泡辅助性T细胞(Tfh),并分析其表面活化分子CD226的表达格局。意义:Tfh是一类新近才鉴定出来的辅助性T细胞亚群,对体液免疫具有重要的调控作用,但其发育分化及功能调控研究开展的还很少,本研究为进一步研究其功能提供了实验依据。方法:密度梯度离心法分离人PBMC,采用不同荧光素标记的抗CXCR5、CD4、CD19及CD
【机 构】
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第四军医大学基础部免疫学教研室,西安,710032
【出 处】
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全军免疫学第七届学术交流会暨免疫学新进展主题论坛
论文部分内容阅读
目的:用免疫荧光染色和流式细胞术鉴定出正常人外周血单个核细胞(PBMC)中的滤泡辅助性T细胞(Tfh),并分析其表面活化分子CD226的表达格局。意义:Tfh是一类新近才鉴定出来的辅助性T细胞亚群,对体液免疫具有重要的调控作用,但其发育分化及功能调控研究开展的还很少,本研究为进一步研究其功能提供了实验依据。方法:密度梯度离心法分离人PBMC,采用不同荧光素标记的抗CXCR5、CD4、CD19及CD226抗体进行染色流式细胞术分析,鉴定出表型为CD4+CXCR5+的T细胞亚群,并分析其表面CD226分子表达格局。
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目的:从70个小分子化合物中筛选出对蓖麻毒素A链拮抗效果比蝶呤酸(阳性对照药)好的先导化合物.意义:蓖麻毒素是从植物蓖麻籽中分离得到的一种Ⅱ型核糖体失活蛋白,分为A链(RTA)和B链.A链是效应链,具有N-糖苷酶活性,通过催化28SrRNA在S/R结构域第4324位脱去一个保守的腺嘌呤使核糖体60S亚基失活,从而阻断蛋白合成,引起细胞死亡.根据蓖麻毒素A链晶体结构确认活性口袋的关键氨基酸残基,通过
目的:构建登革2型病毒(DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。意义为研究NS2B在登革病毒感染中的作用提供研究工具。方法:PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清
目的:探讨CD226在小鼠胸腺细胞上的表达规律及其对胸腺细胞自稳态扩增的影响,并对其机制进行研究。意义:对研究胸腺细胞正常发育和调节不同T细胞亚群的生成具有重要的理论意义。方法:①制备CD226特异性多抗,对其在胸腺细胞上的表达进行研究;②构建CD226 RNA干涉慢病毒载体,在小鼠胚胎胸腺器官培养模型(FTOC)中研究胸腺细胞CD226表达降低对胸腺发育的影响;③在CD226转基因小鼠中研究CD
目的:构建抗人IL-13Rα2单链抗体的原核表达载体,制备具有高亲和力的的单链抗体。意义:IL-13Rα2是特异性高表达于人神经胶质瘤、头颈部肿瘤、卵巢癌和肾癌等恶性肿瘤细胞表面的肿瘤特异性标志物。高亲和力抗人IL-13Rα2的单链抗体将可能在恶性肿瘤的靶向治疗中发挥重要作用。方法:应用杂交瘤技术制备一组小鼠抗人IL-13Rα2的单克隆抗体FMMU-IL-13Rα2-1~14,选取具有较高亲和力并
目的:寻找并证实参与CD4+T细胞活化的miRNA,通过构建双荧光素酶报告系统进一步鉴定相关miRNA的靶基因。意义:筛选参与T细胞活化过程的miRNA及其靶分子有助于我们研究miRNA与适应性免疫应答之间的关系。方法:利用miRNA芯片,分析Jurkat细胞活化前后miRNA表达谱的变化,应用实时荧光定量PCR方法对芯片结果进行验证。构建miRNA的真核表达载体,利用生物信息学方法预测miRNA
目的:制备针对葡萄球菌肠毒素B中毒的单克隆抗体治疗性制剂。意义:为葡萄球菌肠毒素B中毒提供有效的治疗制剂,并可进一步研究超抗原的作用机制。方法:用杂交瘤技术制备针对葡萄球菌肠毒素B的单克隆抗体,用体外人外周血单个核细胞的增殖抑制实验和体内抗体对毒素的中和作用来筛选具有中和活性的抗体,并进行抗体中和能力的评价和协同作用的研究。结果:制备了多株具有中和活性的抗体,并筛选到了具有协同作用的抗体组合。结论
目的:在本实验室已获得高亲和力小鼠抗人BAFF(B细胞活化因子)单克隆抗体的基础上通过分子克隆方法获得该抗体轻、重链可变区基因序列。意义:BAFF分子在B细胞发育、功能调节和自身免疫性疾病的发病中发挥重要作用,通过分子克隆获得该抗体轻、重链可变区基因序列,将为进一步制备对自身免疫性疾病有潜在治疗作用的抗BAFF分子基因工程抗体打下基础。方法:以高亲和力小鼠抗人BAFF单克隆抗体杂交瘤细胞株cDNA
目的:研究单克隆抗体的效价和亲和力之间的对应关系。意义:为单克隆抗体的质量评价提供更真实的检测结果。方法:用间接ELISA测定抗OVA的单克隆抗体的效价,选取效价有显著差异的5株抗体,用竞争ELISA测定其亲和力并与效价测定的结果进行比较。结果:单克隆抗体的效价和亲和力两个评价指标存在不一致的地方。结论:抗原固相化的过程是一个变性的过程,由于这个过程导致了抗原抗体反应在固相与液相的不一致。
目的:研究我国肾综合征出血患者血清抗体识别汉滩病毒核衣壳蛋白的B细胞表位,为免疫学诊断试剂和新型疫苗的研制提供基础性条件。意义:肾综合征出血热是在我国流行的一种严重的传染病,死亡率在2%~10%。致病因子主要是汉滩病毒和汉城病毒,两者位于同一进化树分支,其主要结构蛋白的氨基酸序列具有显著保守性。通过研究肾综合征出血热患者血清抗体识别汉滩病毒结构蛋白的B细胞表位,可以加深我们对于汉滩病毒诱导机体体液
目的:将以caspase-8为主导的细胞凋亡的分子机制导入肿瘤细胞,并以一种可被小分子诱导的方式启动该机制,可以选择性地杀伤肿瘤细胞。意义:为激素依赖性肿瘤的治疗开辟一种新思路。方法:用RT-PCR方法获得人caspase-8和ER基因,以适当方式连接构建融合蛋白基因,并克隆入真核表达载体。构建caspase-8和雌激素受体(ER)的融合蛋白基因,转染并特异表达于ER阳性的乳腺癌细胞系MCF-7和