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目的:利用高通量测序技术检测4T1细胞诱导Balb/c小鼠的乳腺癌移植部位、肺转移部位和脾脏间CD8~+CD25~+Tregs TCRβ链CDR3受体库,探讨不同部位Tregs的来源、分化、克隆增生特征。方法:以4T1细胞诱导Balb/c小鼠为研究对象,选取3只(M1、M2、M3)分别采集肿瘤移植部位(T)、肺转移部位(L)和脾脏组织(SP),分选出CD8~+CD25-总T细胞和CD8~+CD25~+Tregs,提取DNA,送immune SEQ公司进行基因测序,利用immune SEQ分析软件等对序列的多样性、组成及特征进行分析。结果:(1)M1、M2、M3肿瘤移植部位(T)、肺转移部位(L)和脾脏组织(SP)样本中CD8~+CD25~+Treg CDR3序列总数/独特序列数为:M1 T:70550/36725;L:49588/28075;SP:123678/63463;M2 T:15727/9163;L:21797/14317;SP:70940/36243;M3 T:12443/7911;L:22416/12664;SP:59501/38438;(2)M1、M2、M3肿瘤移植部位、肺转移部位和脾脏组织存在相同CD8~+CD25~+Tregs CDR3克隆序列:CASSQETGGYEQYF、CASSRDNNERLFF、CASSRDRGNTGQLYF、CASSQDRGISNERLFF、CASSEGSQNTLYF、CASSRQGANTEVEF、CASSQDWGQNTLYF、CASSSSQNTLYF。(3)M1、M2、M3在Unique序列CDR3区长度的分布与总Productive序列CDR3区长度分布无较大差异均是以42个AA取用为主。结论:4T1细胞诱导Balb/c小鼠的乳腺癌移植部位、肺转移部位和脾脏间CD8~+CD25~+Tregs TCRβ链CDR3受体库分别有着独特的组成和特征,细胞受体库的这种空间异质性可阐述乳腺癌不同部位Tregs的来源、分化、克隆增生特征,探讨"乳腺肿瘤微坏境"对Tregs的影响,为乳腺癌Tregs的机制和应用提供特征CDR3靶标以及新的研究思路与技术。