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目前,辣椒疫病已成为一种毁灭性的世界病害,具有空气传染性和土壤传染性,以土壤传播为主,疫病一旦发生,流行速度极快,因而药剂防治效果不佳。培育抗疫病的辣椒品种是解决这一问题最经济有效的途径。利用单倍体育种技术获得单倍体植株,经人工加倍获得纯合的二倍体,在1～2年即可完成。本研究旨在通过花药培养获得具有疫病抗性的纯合双单倍体（Doubled Haploid,DH）,为育种工作者在短时间内创制抗疫病加工型辣椒新种质提供理论基础。本试验以辣椒‘PPTC54×968’F1为供体亲本材料,通过花药培养将PI201234中的抗病基因转移到968中。花药培养诱导培养基为:MS+0.05 mg·L-1 6-BA+0.01 mg·L-1 2,4-D+30 g·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂+4 mg·L-1AgNO3+4 g·L-1活性炭,pH 5.8。采用分子标记辅助选择与苗期接种相结合的方法鉴定花培再生植株的疫病抗性,所用标记为FQ01/RQ01,引物序列为FQ01:CCATAAGG GTTGGTAAATTTACAAA,RQ01:TCGAGAGATAATTCAGATACTATAATC。DH株系于2018年5月上旬经200 mg·L-1赤霉素处理6 h,播种于50孔穴盘,以消毒的草炭︰蛭石（3:1）为育苗基质,室内育苗。辣椒抗疫病鉴定技术参照辣椒抗疫病鉴定技术规程,该标准适用于各种辣椒资源对辣椒疫病抗性的室内苗期鉴定及评价。通过花药培养诱导出19个胚状体,其中16个诱导成苗。采用分子标记辅助选择的方法鉴定花药培养获得的16个花培DH系的疫病抗性。所用分子标记为FQ01/RQ01,该标记在高抗疫病材料PI201234中能扩增出1条717 bp的特异条带,而高感疫病材料Early calwonder中则无特异条带,在16个DH系中有7个能扩增出与PI201234相同的带型,9个无特异条带。说明这7个DH系为抗疫病材料。为进一步确定其疫病抗性,采用苗期接种疫霉菌进行抗性鉴定,结果表明,7个DH系病情指数为2.33～38.40,其中5个DH系病情指数<8,而H201607-7发病最轻,病情指数为2.33。由此可知,花药培养的方法与分子标记辅助选择的方法是快速高效地创制优抗疫病新种质的有效途径。