猪瘟病毒E2蛋白乳酸菌表达系统的构建

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猪瘟(Swine fever)是由猪瘟病毒(Classic Swine FeverVirus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,猪是该病毒唯一的自然宿主。E2即gp55,是CSFV的囊膜糖蛋白之一,是猪瘟病毒最重要的中和性抗原,也是病毒所有糖蛋白中保守性最低、最易变异的蛋白,因此常选择CSFV的E2蛋白作为检测猪瘟和制备亚单位疫苗的候选抗原。本试验在诱变猪瘟E2稀有密码子,以适以原核表达,构建原核表达质粒pET28aE2的基础上,使用重组原核表达菌株BL21(DE3)/pET28aE2,经重组PCR技术,对猪瘟病毒E2基因进行PCR扩增,将PCR扩增的E2基因克隆至乳酸菌表达质粒pNZ44中,构建了猪瘟病毒E2基因的乳酸菌重组表达质粒pNZ44-E2。将pNZ44-E2转入受体菌乳杆菌中,通过优化生长条件,有效表达了猪瘟病毒主要保护性抗原E2基因,免疫印迹试验表明所表达的蛋白是CSFV特异性的。研究为猪瘟E2蛋白在猪瘟的口服免疫及粘膜免疫防制方面的应用奠定了基础,也为乳酸菌的性能改进提供了新的思路。
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