O型口蹄疫病毒嵌合体的构建及病毒拯救

来源 :中国畜牧兽医学会2009学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dfsdasdas
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目的:口蹄疫(FMD)是当前危害猪、牛、羊等偶蹄动物的重要传染病,为了有效防控消灭该病,我国采取的是以免疫为主的综合防控措施,制苗毒株的选择是疫苗生产过程中考虑的最重要因素之一,因此本文旨在筛选或构建一株低致病力,免疫原性与田间流行毒株相匹配的制苗毒株。 方法:T7RNA聚合酶表达质粒,质粒p43-CHA90-LL由猪源O型口蹄疫制苗种毒p43-CHA90缺失Lpro构建而成。猪源流行毒株结构蛋白基因(P1区)由广东省动物疫控中心扩增提供。试验以构建成功的缺失Lpro基因的口蹄疫病毒毒株OZK/93为基础,删除结构蛋白VPl、VP2和VP3的编码基因,引入多克隆位点,构建成口蹄疫病毒的通用载体p43-CHA90-LL-Vector,在此载体的多克隆位点处插入广东省猪源流行毒株(GD16) Pl区基因中VP3、 VP2、VPl基因序列,拯救嵌合病毒,并传了3代,通过蚀斑试验、PT-PCR及测序检测病毒。 结果:通用载体p43-CHA90-LL-Vector构建成功;含流行毒株GD16的嵌合病毒构建成功;拯救出活病毒;RT-PCR及测序分析嵌合病毒未发生变异。
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