【摘 要】
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目的：研究孕酮对人子宫内膜细胞RL95-2与人滋养层细胞BeWo球体外粘附和铺展的影响，探讨孕酮影响胚胎着床的相关分子调控机制。方法：将人滋养层细胞BeWo消化后放人无血清培养基，细胞悬液在预先用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)包被的低吸附培养皿中培养17-24小时自发增殖形成球状体，将球状体先后经过70 μm和1OOp m两种不同直径的细胞筛过滤以筛选出与自然胚胎大小相似的球状体(70μm-100 μm
【机 构】
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苏北人民医院妇产科 扬州大学临床医学院
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目的：研究孕酮对人子宫内膜细胞RL95-2与人滋养层细胞BeWo球体外粘附和铺展的影响，探讨孕酮影响胚胎着床的相关分子调控机制。方法：将人滋养层细胞BeWo消化后放人无血清培养基，细胞悬液在预先用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)包被的低吸附培养皿中培养17-24小时自发增殖形成球状体，将球状体先后经过70 μm和1OOp m两种不同直径的细胞筛过滤以筛选出与自然胚胎大小相似的球状体(70μm-100 μm)，并将其与预处理的RL95-2单层细胞共培养制备体外胚胎着床模型。在此模型的基础上，通过间接免疫荧光方法观察骨桥蛋白(OPN)在RL95-2细胞和BeWo细胞上的定位表达，采用RT-PCR技术和Western blot技术检测不同浓度的孕酮作用对RL95-2细胞骨桥蛋白mRNA和蛋白表达的影响，通过粘附实验和铺展实验观察不同浓度的孕酮作用对BeWo球状体在RL95-2单层细胞上粘附和植入的影响。
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